page_banner

Нуклеин қышқылын анықтау флуоресценциясының сандық Ct мәні – махаббатты жек көру параметрі

Нуклеин қышқылын анықтау флуоресценциясының сандық Ct мәні – махаббатты жек көру параметрі

«Коронарлық вирустық пневмонияны диагностикалау және емдеудің жаңа бағдарламасы (Сынақ тоғызыншы шығарылымы)» оқшаулауды басқару немесе босату үшін маңызды негіздердің бірі ретінде Ct мәні ≥35 нуклеин қышқылын анықтауды пайдаланады.Сонымен, нуклеин қышқылын анықтау жинағының Ct мәні нені білдіреді?Әртүрлі жинақтардың Ct мәндерін салыстыруға болады ма?Ct мәні неғұрлым төмен болса, жинақтың өнімділігі соғұрлым жақсы бола ма?
Ct мәні (Threshold Cycle, Ct) – нақты уақыттағы флуоресценцияның сандық флуоресценция сигналының қарқындылығы белгіленген шекті мәннен асқан кездегі ПТР циклдарының саны.Нуклеин қышқылын анықтау жинақтары мысал ретінде жаңа тәжді алады.А және В вирусы бар екі үлгіні анықтауға арналған бір жинақтың бірдей реакциясы үшін Ct мәнінің өлшемі белгілі бір дәрежеде вирустық геннің көшірмелерінің санын, яғни вирустық жүктемені білдіреді.В үлгісінің Ct төмен болған сайын вирустық жүктеме жоғары болады.Ct мәні вирустық жүктемеге және оның жұқпалылығына кері пропорционал.Әр түрлі нақты уақыттағы флуоресценттік сандық жинақтардың жақсы және жаман жақтарын тек Ct мәнінің өлшемі бойынша бағалауға болмайды, себебі әртүрлі жинақтардың Ct мәндерін салыстыруға болмайды.Жинақтың өнімділігін бағалау сезімталдық (ең төменгі анықтау шегі), ерекшелік, дәлдік, тұрақтылық және диагностикалық қолдану аспектілерінен өлшенуі керек.Әрбір реагент өндірушісінің жекпе-жек өнерінің он сегіз түрі бар және олардың қолдануда өздерінің сиқырлы күштері бар, сондықтан мен мұнда егжей-тегжейлі айтпаймын.
Кәдімгі нақты уақыттағы сандық ПТР (QPCR) талдау құралдары/жүйелері үшін Ct мәндерін алу және оларды патогенді анықтау қолданбаларында кеңінен қолдану барлығына таныс.Өнеркәсіптің дамуымен және технологияның дамуымен QPCR жабдықтары мен реагенттері мүмкіндіктер мен қиындықтарға тап болды.Yiou Think Tank (Қытайдың генетикалық тестілеу индустриясы бойынша 2021 жылғы зерттеу есебі: Технология) менің елімнің QPCR индустриясындағы компаниялардың көпшілігі технологияға негізделген ортақ мәселелерге тап болатынын талдады.Осы мәселелерге жауап ретінде шешімдер негізінен екі түрге бөлінеді: технологияны жетілдіруді жеделдету және жаңа технологияларды енгізу.
QPCR молекулалық диагностикасына арналған POCT саланың даму бағыттарының бірі болып табылады және өнімділікті жақсарту технологияны қолдануды жеделдетудің маңызды факторы болып табылады.QPCR бір үлгілік өткізу қабілеті бар POCT жабдығы үшін ҒЗТКЖ-дағы бір реакцияның негізгі параметрінің Ct мәнін қалай оңтайландыруға болады?Бірдей жабдық, бірдей реакция жүйесі және бірдей шаблон концентрациясы, теориялық тұрғыдан бір реакцияның Ct мәні неғұрлым үлкен болса, реакциядағы ферменттің тиімділігі соғұрлым төмен болады.
Ферменттік реакцияның тиімділігін арттыру және Ct мәнін оңтайландыру процесінде алдымен 40 ПТР циклінің флуоресценциясының сандық күшейту қисығын талдауға болады.Төмендегі суреттегі күшейту қисығы флуоресценттік фондық фазаға, экспоненциалды күшейту фазасына, сызықтық фазаға және плато фазасына бөлінген.Төменгі флуоресценциялық фонға қол жеткізу үшін оны ерте экспоненциалды күшейтудің флуоресценция мәнінен мүмкіндігінше ажырату үшін реакция шығын материалдарын тасымалдаушыдан, праймер зондының дизайнын скринингтен және реакция буферінен сынау қажет.Экспоненциалды күшейту кезеңі фермент белсенділігінің ең тікелей реакциясы болып табылады, сонымен қатар ол POCT жабдығы, реакция тасымалдаушылары мен реагенттерінің тамаша үйлестіруінің дәлелі болып табылады.Осы уақытта жабдықтың температурасын бақылау, оптикалық сигналды алу және талдау, тасымалдаушының биоүйлесімділігі және реагенттердің жүйе өнімділігін барлық аспектілерде реттеу және сынау қажет.Соңында, бүкіл күшейту аяқталды және қолайлы Ct мәнін алу үшін нәтижелер қатаң деректер алгоритмімен ұсынылуы керек.
КТ сызығы
Ct мәнін оңтайландырудың шағын қадамы ҒЗТКЖ персоналының сансыз қадамдары болып табылады.Күн мен түннің уайымы мен толқуында «Тау мен өзен көрінбейді, талдар түнеріп, гүл жарқырап, басқа ауыл бар» деген сайын алға ұмтылуға жігер мен құштарлық. қайтадан.


Жіберу уақыты: 29 қыркүйек 2022 ж